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CRM-YTX-c 蝦夷扇貝毒素Yessotoxin標(biāo)準(zhǔn)品制備方法

發(fā)布時(shí)間: 2022-09-26  點(diǎn)擊次數(shù): 767次

CRM-YTX-c 蝦夷扇貝毒素溶液的制備

YTX是從新西蘭Cawthron研究所(Cawthron Institute,Cawthron Institute)培養(yǎng)的甲藻中分離得到的,YTX的制備和純化是在Cawthron研究所進(jìn)行的。最后在NRC、Halifax上進(jìn)行了純度測(cè)定,用1 HNMR和高分辨LC-MS確證了YTX的結(jié)構(gòu)和純度。測(cè)定了YTX的[M-H]離子的測(cè)量精度m/z為1141.4704±0.0001(△=-1.1ppmC55H81O21S2-)(圖1A)。碰撞誘導(dǎo)離解光譜(圖1B)與以前的YTX CRMS和文獻(xiàn)報(bào)道相匹配[4]。

通過(guò)將純化的YTX溶解在CD:OH中制備了一種原料溶液,用于定量核磁共振[5]。通過(guò)對(duì)qNMR原液的準(zhǔn)確稀釋、高純度的甲醇,制備了CRM溶液,并將其分配到清潔的氬填充琥珀玻璃片中,并立即進(jìn)行火焰密封。



分析方法與價(jià)值分配

CRM-YTX-c的驗(yàn)證值是基于NRC使用兩種方法得到的結(jié)果:qNMRon庫(kù)存YTX溶液使用NLST苯甲酸SRM作為校準(zhǔn)劑,LC-MSMS采用酸性pH流動(dòng)相使用CRM-YTX-b(批號(hào)20120328)進(jìn)行校準(zhǔn)。

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同質(zhì)性

從FLAL系列中篩選出具有代表性的CRM-YTX-c安瓿(n=25),用方差分析(ANOVA)對(duì)LC-MS/MS測(cè)定的YTX濃度進(jìn)行評(píng)價(jià),并檢測(cè)出不顯著的異質(zhì)性。


穩(wěn)定性研究

對(duì)CRM-YTX(批號(hào)20060308)進(jìn)行了短期和長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究,由于其生產(chǎn)過(guò)程和濃度范圍與CRM-YTX-c 蝦夷扇貝毒素溶液相當(dāng),穩(wěn)定性比較合理,穩(wěn)定性研究表明YTX在-12°甲醇中的降解不明顯,持續(xù)時(shí)間為一年。

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